Novoprotein mRNA疫苗與藥物

研究必備!報告基因circRNA/mRNA已為您配齊,試用申請進行中

研究必備!報告基因circRNA/mRNA已為您配齊,試用申請進行中

Novoprotein 2023-06-28 17:44 發表於上海

在分子生物學研究範疇中,報告基因(reporter gene)作為常用的基因工具,發揮著不可替代的重要作用。報告基因是一種編碼易被檢測的蛋白質基因,與目的基因融合表達後,其表達產物可以用來標定目的基因的表達情況。通常通過直接測定報告基因mRNA、蛋白或酶活性來檢測報告基因是否在細胞中表達。

報告基因的種類很多,綠色螢光蛋白基因(GFP)因其易於檢測、螢光性質穩定、無細胞毒性、可用於活細胞檢測等優點,而被廣泛用於生命科學研究。用395nm的紫外線和475nm的藍光激發,GFP可在508nm處自行發射綠色螢光,無需輔助因數和底物,用常規的螢光顯微鏡即可定性檢測胞內表達情況。增強型綠色螢光蛋白(eGFP)突變體,發射出的螢光強度比野生型GFP大6倍以上,因此,比GFP更適合作為一種報告基因來研究基因表達、調控、細胞分化及蛋白質在生物體內定位和轉運等。螢火蟲螢光素酶(Firefly luciferase)是一種分子量約為61kD的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發出波長為560nm左右的生物螢光(bioluminescence),是目前體內外檢測實驗中最常用的螢光素酶,可作為對照研究靶基因在哺乳動物細胞中的翻譯效率,細胞活力和體內成像測定。

Novoprotein繼eGFP mRNA和Luciferase mRNA成品後,現已配齊eGFP circRNA成品(目錄號:MR201)和Luciferase circRNA(目錄號:MR202)。兩款circRNA通過序列設計,體外轉錄後利用Ⅰ型內含子自剪切的方式合成,獨特的環狀RNA 共價封閉結構可防止RNA 被核酸外切酶降解,相對於線性mRNA 具有更高的生物穩定性。


圖1.螢光結果顯示,eGFP circRNA轉染細胞24小時後檢測,蛋白成功表達,且表達效率優於品牌A

 

圖2.螢光結果顯示,eGFP  circRNA轉染細胞96小時後檢測,蛋白成功表達,且表達效率優於品牌A

 

隨著核酸疫苗的不斷發展,除mRNA疫苗外,諸如自複製mRNA和circRNA等新型路線也逐漸走入大眾視野,隨著資本的大量湧入,circRNA技術迅速發展起來。序列設計的不斷優化和環化工藝的進一步探索,circRNA的各項技術壁壘被逐步打破。越來越多的研發管線加入,以滿足臨床治療需求,circRNA未來可期。

報告基因在靶基因的表達研究,和遞送研究中發揮著重要作用。近岸蛋白成品報告基因circRNA及mRNA表達效率高,無RNA酶殘留,受到廣大核酸疫苗藥物研究客戶的青睞。

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