報告基因mRNA再添一員-mCherry mRNA
Novoprotein 2023-06-15 18:42 發表於上海
螢光蛋白是一種生命科學領域必不可少的光學成像工具，螢光蛋白可以被用來進行活細胞成像，運用螢光蛋白可以標記蛋白的表達，有些蛋白質組學的實驗也可以通過利用螢光蛋白來實現，綠色螢光蛋白（green fluorescent protein, GFP）、紅色螢光蛋白（red fluorescent protein, RFP）、橙色螢光蛋白（orange fluorescent protein, OFP）是目前比較常用的螢光蛋白，這些螢光蛋白被廣泛的應用到細胞成像中。
1999年紅色螢光蛋白首次被報導，以其能夠與GFP共同使用，解決一些GFP單獨解決不了的科學問題，同時因其激發和發射波長更長，在細胞內成像時背景低等優點，受到廣大科研工作者的青睞。mCherry是一種紅色螢光蛋白的變種，來自於mushroom coral的紅色螢光蛋白，被廣泛用於生物技術作為示蹤劑的紅色螢光染料，包括分子的標記和細胞組分的定位等。表現出卓越的螢光亮度及光穩定型，以及更低的細胞毒性。
近岸蛋白推出的mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) （目錄號：MR105）是一種編碼紅色螢光蛋白的報告mRNA，其最大激發光和發射光分別為587nm和610nm。通過引入N1-Me-Pseudo UTP替換天然UTP，有效降低mRNA在哺乳動物細胞中的自身免疫原性，增強mRNA的穩定性。同時模擬具有5'Cap 1結構和3'poly(A)尾巴的成熟mRNA，是使用各種測定法研究轉染和表達的理想工具。
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圖1. Novoprotein mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)結構，mRNA長度為1195nt，所有UTP均替換為N1-Me-Pseudo UTP
產品純度高
圖2 瓊脂糖凝膠電泳及毛細管電泳雙重檢測，保證產品純度及完整性
圖3 LC-MS結果顯示，mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) Cap0+Cap1的加帽率達到96.58%
螢光表達活性高
將mCherry mRNA轉染至HEK 293T細胞中，轉染24h/96h後通過流式細胞儀和螢光成像儀檢測轉染效率及表達情況。
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圖4 mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)轉染細胞24小時成功表達，96小時表達依然明顯
報告基因在靶基因的表達研究，和遞送研究中發揮著重要作用。Novoprotein成品報告基因mCherry mRNA具有螢光亮度高，螢光穩定性強的特點，此外為了滿足廣大客戶的科研需求，Novoprotein還提供eGFP mRNA、eGFP circRNA、Firefly Luciferase mRNA等成品RNA，Novoprotein成品報告基因circRNA及mRNA表達效率高，無RNA酶殘留，受到廣大核酸疫苗藥物研究客戶的青睞。
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